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核酸蛋白檢測儀應用及方法
核酸蛋白檢測儀
核酸蛋白檢測儀是層析分析的主要裝置,核酸蛋白檢測儀配上層析柱、恒流泵、部分收集器、層析譜分析系統(根據需要選配)和電腦打印設備即構成一套完整的核酸蛋白檢測儀分離層析系統。它是當今從事生命科學研究、藥物測定、化工、食品科學及醫學研究等行業的現代分析實驗儀器。核酸蛋白檢測儀分析系統廣泛用于工業、農業、科研和大專院校的科學研究和教學實驗。
核酸蛋白檢測儀其原理是根據物質(樣品)對紫外光有明顯吸收的特征,實現對樣品成份含量比對分析,以便進行樣品蛋白、核酸物質識別檢測和含量測定。在生化分析、環??茖W、食品研究、毒理研究、新藥開發等領域中對核酸、蛋白檢測、純化和提取提供了一種的分析手段。
紫外分析儀
紫外檢測原理基于被測組分和背景電解質的吸光度不同,當被檢測組分通過檢測窗時,吸光度發生變化服從朗伯-比爾定律,即在一定的實驗條件下,吸光度與被測組分的濃度成正比。
紫外分析儀用于核酸蛋白檢測
紫外-可見光分光光度計在生物科技中可用于測定核酸和蛋白質的濃度。
首先,核酸的基本結構單位是核苷酸。核苷酸由一個含氮堿基(嘌呤或嘧啶),一個戊糖(核糖或脫氧核糖)和一個或幾個磷酸組成。由于核酸的堿基具有共軛雙鍵,因而有紫外吸收的性質。各種堿基、核苷和核苷酸的吸收光譜略有區別。核酸的紫外吸收峰在260nm附近,可用于測定核酸。根據260nm與280nm的吸收光度(A260)可判斷核酸純度。
再談蛋白質,構成它的組成是氨基酸,其中的種類包含酪氨酸、苯丙氨酸和色氨酸,這幾種芳香族氨基酸的苯環含有共軛雙鍵,使蛋白質具有吸收紫外光的性質。吸收高峰在280nm處,其吸光度(即光密度值)與蛋白質含量成正比。所以,紫外吸收法是280 nm 的光吸收法,含有核酸的蛋白質溶液使用280 和260 nm 的吸收差法較好。蛋白質的稀溶液采用215 與225 nm 的吸收差法。
此外,蛋白質溶液在238nm的光吸收值與肽鍵含量成正比。利用一定波長下,蛋白質溶液的光吸收值與蛋白質濃度的正比關系,可以進行蛋白質含量的測定。紫外吸收法簡便、靈敏、快速,不消耗樣品,測定后仍能回收使用。
還有一些測定蛋白質的方法,是通過蛋白質與一些物質的作用產生顏色,然后在此有色光光譜內測定吸光度。將已知濃度的蛋白質溶液稀釋幾個倍數,與物質作用后作為標準品,測定吸光度做出一條曲線,然后未知溶液的濃度就可通過吸光度來得出。這些方法包括,凱氏定氮法,考馬斯亮藍法(Bradford),Folin-酚試劑法(Lowry法)和BCA法。
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